Pewarnaan Ziehl-Neelsen

Tujuan umum    : 

Mewarnai sediaan apus menggunakan metode Ziehl Neelsen dengan baik dan benar. 

Prinsip    : 

Sediaan diwarnai dengan larutan carbol fuchsin 0,3% untuk mewarnai BTA, kemudian dilakukan dekolorisasi denga asam alcohol 3%. Pada proses ini BTA tidak akan kehilangan warna merahnya. dan untuk  membuat kontras/latar belakang diberikan pewarna tandingan methylen Blue 0,3%, maka akan tampak  BTA berwarna merah dan yang bukan BTA berwarna biru.

Alat        : 

1.  Rak pewarnaan
2.  Corong lengan 
3. Pipet pasteur/pipet tetes.
4. Pinset. 
5. Timer.
6. Lampu spiritus.

Bahan    : 

1. Larutan Carbol Fuchsin 0,3%.
2. Larutan Asam alcohol 3%
3. Larutan Methylen blue 0,3%
4. Kertas saring       

Cara Kerja     :

1. Letakan sediaan sputum yang telah difiksasi pada rak dengan apusan menghadap ke atas.
2.  Teteskan larutan carbol fuchsin 0,3% dengan melalui corong yang telah diberi kertas saring pada apusan sputum sampai menutupi seluruh permukaan sediaan sputum.
3. Panaskan dengan nyala api spiritus sampai keluar uap selama 3-5 menit(tidak boleh mendidih/kering).
4. Singkirkan api spiritus, diamkan selama 5 menit.
5. Bilas dengan air mengalir pelan sampai zat warna merah yang bebas terbuang.
6. Tetesi sediaan dengan larutan asam alcohol 3% sampai warna merah fuchsin hilang.
7. Bilas dengan air mengalir pelan.
8. Teteskan larutan methylen blue 0,3% pada sediaan sampai menutupi seluruh permukaan.
9. Diamkan 10 – 20 detik.
10. Bilas dengan air mengalir pelan.
11. Keringkan pada suhu kamar.